Asynchrony between in vivo and in vitro rabbit embryos

Background: Comparative features of embryos developed under in vitro and in vivo conditions are particularly important in designing embryo transfer procedures that fulfil embryo-recipient synchronization requirements. Objective: To determine the degree of asynchrony in rabbit embryo development between cultured and in vivo embryos. Methods: A total of 55 non- lactating multiparous female rabbits were used. Embryos were classified as 16-cells or early morulae at 48 hours post-coitum (hpc). Embryos were cultured during 30 or 32 h and embryo development was compared with in vivo embryos of 72 hpc. In vitro and in vivo embryos at 72 hpc were classified as early or compacted morulae. Bayesian statistics was used. Difference between in vivo and in vitro embryos and the actual probability of the difference between the in vivo and in vitro embryo higher than zero (P) was estimated. Results: The percentage of compacted morulae was higher in in vivo embryos than in in vitro embryos with +6 h of asynchrony (73.5 and 32.8%, P=1.00). But the percentage of compacted morulae was similar with +8 h asynchrony. Conclusions: In vitro embryos delay their development by + 8 hours compared to in vivo embryos.

Antecedentes: El desarrollo comparativo de embriones producidos in vitro e in vivo es particularmente importante para el diseño de procedimientos de transferencia de embriones cuando se requiere sincronización entre el embrión y la hembra receptora. Objetivo: Determinar el grado de asincronía en el desarrollo embrionario entre embriones in vivo y cultivados. Métodos: Un total de 55 conejas multiparas no lactantes fueron utilizadas. Los embriones se clasificaron en 16 células o mórulas tempranas a las 48 horas después del coito (hpc). Los embriones se cultivaron durante 30 ó 32 horas y el desarrollo embrionario se comparó con embriones de 72 hpc obtenidos in vivo. Los embriones in vitro e in vivo a 72 hpc se clasificaron como mórulas tempranas o compactas. Se utilizó estadística bayesiana. Se estimó la diferencia entre embriones in vivo e in vitro y la probabilidad de que la diferencia sea superior a cero (P). Resultados: El porcentaje de mórulas compactas fue mayor en embriones in vivo que en embriones in vitro con +6 horas de asincronía (73,5 y 32,8%, P=1,00), pero el porcentaje de mórulas compactas fue similar con asincronía de +8 horas. Conclusión: Los embriones cultivados retrasan +8 horas su desarrollo en comparación con los embriones in vivo.

Antecedentes: A aquisição do desenvolvimento de embriões produzidos in vitro e in vivo é particularmente importante na concepção de procedimentos de transferência de embriões em que a sincronização entre o embrião e a fêmea receptora é necessária. Objetivo: Determinar o grau de assincronia no desenvolvimento embrionário entre embriões cultivados e in vivo. Métodos: Um total de 55 coelhos multíparos não lactantes foram usados. Os embriões foram classificados em 16 células ou mórulas iniciais 48 horas de gestação (hpc). Os embriões foram cultivados por 30 ou 32 horas e o desenvolvimento embrionário foi comparado com embriões de 72 hpc obtidos in vivo. Embriões in vitro e in vivo a 72 hpc foram classificados como mórulas precoces ou compactadas. Estatísticas bayesianas foram usadas. A diferença entre embriões in vivo e in vitro e a probabilidade de que a diferença seja maior que zero (P) foi estimada. Resultados: A porcentagem de mórulas compactadas foi maior em embriões in vivo do que em embriões in vitro com +6 horas de assincronia (73,5 e 32,8%, P=1,00). Mas a porcentagem de mórulas compactadas foi semelhante com assincronia de +8 horas. Conclusão: Embriões cultivados atrasam seu desenvolvimento em +8 horas em comparação com embriões in vivo.

Preliminary study of rabbits as an animal model of mammalian eye transplantation and literature review / Estudo preliminar de coelhos como modelo animal para transplante de olho em mamíferos e revisão da literatura

ABSTRACT Purpose: To describe an innovative animal model of eye transplantation used in rabbits. Methods: six Dutch-belted male rabbits were submitted to lateral orbitotomy in the right eye, wide retrobulbar anatomy exposure, dissection of the structures, identification and distal section of the optic nerve followed by anastomosis either by vicryl (group 1) or fibrin glue (group 2). Electroretinography recording was performed before the section of the optic nerve and every 30 seconds after, to monitor the function of retina. Left eye was used as control group. Results: After optic nerve resection and anastomosis, stable ERG amplitude of the right eye was lost after 302 seconds in group 1 and after 296 seconds on group 2. Left eye kept longer stable ERG amplitude curves. Conclusions: The animal model of whole eye transplantation was effective in describing a novel technique to be used in rabbits, with success of the anatomic procedure. Further studies will clarify the best anastomosis methods and maintenance of function of the receptor organ. Translational relevance: this animal model of whole eye transplantation provides a novel perspective for blind patients and the research models, since we describe a novel mammal animal model. This model can be used as basis of a human model of whole eye transplantation in future studies.

RESUMO Objetivo: Descrever uma técnica cirúrgica inovadora para transplante de olho em um modelo animal em coelhos. Métodos: Seis coelhos machos com Dutch Belted foram submetidos à orbitotomia lateral do olho direito, com ampla exposição da anatomia retrobulbar, dissecção do cone muscular, exposição e secção distal do nervo óptico seguida de anastomose por vicryl (Grupo 1) ou cola de fibrina (Grupo 2). O registro da eletrorretinografia foi realizado antes da secção do nervo óptico e a cada 30 segundos após, para monitorar a função da retina. O olho esquerdo foi usado como grupo controle. Resultados: Após a ressecção do nervo óptico, a estabilidade da amplitude da eletrorretinografia foi perdida no olho direito após 302 segundos no Grupo 1 e após 296 segundos no Grupo 2. O olho esquerdo manteve eletrorretinografia estável por períodos mais longos. Conclusão: O modelo animal de transplante total de olho foi eficaz em descrever uma nova técnica cirúrgica para ser utilizada em laboratório com coelhos, com sucesso do procedimento anatômico. Novos estudos esclarecerão os melhores métodos de anastomose e manutenção da função do órgão receptor.

Location and Vascular Classification of 188 parathyroid glands in New Zealand White Rabbits / [Localização e Classificação Vascular de 188 glândulas paratireoidianas em coelhos brancos da Nova Zelândia]

The function and protection of the parathyroid glands are increasingly popular research topics. New Zealand white rabbits are the most commonly used animal model of parathyroid ischemia. However, information on the vasculature of their parathyroid glands is limited. We used 94 healthy New Zealand white rabbits, 3-4 months of age and 2-3kg in weight, for exploration of the parathyroid glands, which were stained using hematoxylin and eosin (HE) after removal. The following types were classified according to the relationship between the position of the inferior parathyroid gland and the thyroid: Type A, Close Type, Type B, and Distant Type. There were 188 cases, 4 where the inferior parathyroid glands were located near the dorsal side of thyroid (2.13%), 8 where the inferior parathyroid glands were located superior to the upper pole of the thyroid (4.26%), 20 where the inferior parathyroid glands were located parallel to the thyroid (10.64%), and 155 cases where the inferior parathyroid glands were located inferior to the lower pole of thyroid (82.45%). Identifying the location and classifying the vasculature of the parathyroid glands in New Zealand white rabbits will provide an anatomical model to assist in future research.(AU)

A função e proteção das glândulas paratireoidianas é um tópico de pesquisa cada vez mais popular. Coelhos brancos da Nova Zelândia são o modelo animal mais comumente usada para isquemia da paratireóide. Porém, informação sobre a vasculatura de suas glândulas paratireóides é limitada. Foram usados 94 coelhos brancos da Nova Zelândia saudáveis, com 3-4 meses de idade, 2-3kg de peso, para exploração das glândulas paratireóides, que foram coradas com hematoxilina e eosina (HE) após a remoção. Os seguintes tipos foram classificados de acordo com a relação entre a posição da glândula paratireoidiana inferior e a tireoide: Tipo A, Tipo Próximo, Tipo B e Tipo Distante. Houve 188 casos, 4 em que as glândulas paratireoidianas inferiores estavam localizadas próximas ao lado dorsal da tireoide (2.13%), 8 onde as glândulas paratireoidianas inferiores estavam localizadas superiores ao polo superior da tireoide (4.26%), 20 onde as glândulas paratireoidianas inferiores estavam localizadas paralelo à tireoide (10.64%) e 155 casos em que as glândulas paratireoidianas inferiores estavam localizadas inferiores ao polo inferior da tireoide (82.45%). A identificação da localização e a classificação da vasculatura das glândulas paratireóides em coelhos brancos da Nova Zelândia fornecerão um modelo anatômico para auxiliar em pesquisas futuras.(AU)

Clinical assessment of acid-base balance in Netherland Dwarf rabbit / Avaliação clínica do equilíbrio ácido-básico em coelhos Anã Holandês

Pet rabbits have increased their popularity in a lot of countries. However, most of the laboratory profiles in rabbit medicine come from the observations made in rabbit as biomodels or meat production. So that further researches are necessary to obtain reference values for hematology and biochemical profiles in pet rabbits and the different breeds, especially, in relation to acid-base balance. The aim of this report was to offer the mean values of the main parameters connected with acid-base profile in Netherland Dwarf breed. Thirty-five healthy rabbits (15 males and 20 females) were studied. Venous blood sample from lateral saphenous vein was analyzed to measure: haematocrit, haemoglobin, blood urea nitrogen, glucose, blood pH, partial pressure of CO2 (pCO2), total CO2, ions bicarbonate, chloride, sodium, potassium, base excess and anion Gap. Results showed a shorter range that those reported by different researchers. Moreover, differences between genders were showed in pCO2, its values were higher in males. It may be associated with a greater cellular metabolism. Values obtained in this research should be taken into account by veterinary clinicians for this breed in their clinical assessments. Besides, these values provide new results in parameters with few reference values.

A popularidade de coelhos como animais de estimação aumentou em muitos países. No entanto, a maioria dos perfis de laboratório em medicina de coelhos advém das observações de biomodelos animais ou da produção de carne. Assim, são necessárias pesquisas adicionais para obter valores de referência para hematologia e perfis bioquímicos em coelhos de estimação, e das diferentes raças, especialmente, em relação ao equilíbrio ácido-base. O objetivo deste relatório foi oferecer os valores médios dos principais parâmetros ligados ao perfil ácido-base na raça Anã Holandês. Trinta e cinco coelhos saudáveis ​​(15 machos e 20 fêmeas) foram estudados. A amostra de sangue venoso da veia safena lateral foi analisada para mensuração: hematócrito, hemoglobina, nitrogênio ureico sanguíneo, glicose, pH sanguíneo, pressão parcial de CO2 (pCO2), CO2 total, íons bicarbonato, cloreto, sódio, potássio, excesso de base e ânion Gap. Os resultados apresentaram um intervalo menor do que aqueles relatados por diferentes pesquisadores. Além disso, as diferenças entre os gêneros foram mostradas na pCO2, seus valores foram maiores no sexo masculino. Pode estar associado a um maior metabolismo celular. Os valores obtidos nesta pesquisa devem ser levados em consideração pelos clínicos veterinários para esta raça em suas avaliações clínicas. Além disso, esses valores fornecem novos resultados em parâmetros com poucos valores de referencia.

HMGB1 and inflammatory cytokines in experimental acute lung injury induced in rabbits / [HMGB1 e citocinas inflamatórias em lesão pulmonar aguda experimental induzida em coelhos]

The aim of this work was to measure HMGB1, TNF-alpha, and IL-8 in bronchoalveolar lavage (BAL), serum and TLR2 and TLR4mRNA expression in lung tissue of rabbits with two grades of acute lung injury (ALI). The animals were randomly assigned to groups with severe (S) and mild/moderate (MM) ALI, induced with warm saline, and a control group. HMGB1, TNF-alpha, IL-8, TLR2mRNA and TLR4mRNA were measured after ALI induction. The results showed increased levels of IL-8, TNF-alpha, HMGB1 and TLR4mRNA in the ALI groups. HMGB1, IL-8 and TNF-alpha concentrations in BAL were higher in S compared MM. Increased TLR4mRNA was observed in S and MM versus control. The results suggest an early participation of HMGB1 in ALI together with IL-8 and TNF-alpha and association with severity. TLR4 has early expression and role in ALI pathophysiology but is not associated with severity.(AU)

O objetivo deste trabalho é determinar os níveis de HMGB1, TNF-alfa e IL-8 no lavado broncoalveolar (BAL), bem como quantificar a expressão sérica de TLR2 e TLR4 mRNA em tecido pulmonar de coelhos com dois graus de lesão pulmonar aguda (LPA). Os animais foram distribuídos aleatoriamente em grupos com LPA grave (S) e leve / moderada (MM), induzidas com solução salina morna, e um grupo controle. HMGB1, TNF-alfa, IL-8, TLR2mRNA e TLR4mRNA foram medidos após a indução de LPA e quatro horas de ventilação mecânica. Os resultados mostraram níveis aumentados de IL-8, TNF-alfa, HMGB1 e TLR4mRNA nos grupos com LPA. As concentrações de HMGB1, IL-8 e TNF-alfa no LBA foram maiores no S comparado ao MM. Aumento de TLR4mRNA foi observado em S e MM versus controle. Os resultados sugerem uma participação precoce da HMGB1 na LPA em conjunto com IL-8 e TNF-alfa e associação com a gravidade da LPA. O TLR4 foi expresso na ALI e possivelmente possui papel precoce na fisiopatologia da LPA, mas sem associação com a gravidade.(AU)

Bothrops alternatus snake venom induces apoptosis of skeletal muscle cells in a rabbit model / O veneno da serpente Bothrops alternatus induz apoptose nas células musculares de coelhos

Este estudo objetiva reportar a ocorrência de apoptose in vivo induzida pelo veneno da serpente Bothrops alternatus em células musculares esqueléticas. Cinco coelhos machos, adultos, receberam 150µg/kg de veneno no músculo vasto lateral, enquanto outros cinco animais receberam 0,1% de BSA diluído em PBS no mesmo local. Após 12 horas, os animais foram eutanasiados, e amostras do local de inoculação foram coletadas para análise histopatológica. Foram evidenciadas necrose e hemorragia nas células musculares. Além disso, a análise imuno-histoquímica para identificação de caspase-3 ativada revelou marcações granulares e agregadas no citoplasma das células musculares, compatíveis com o processo de apoptose. Este é o primeiro relato que confirma o veneno de B. alternatus como causador de apoptose in vivo em células musculares esqueléticas.(AU)

Cooking ways on composition of intramuscular phospholipid fatty acids of inra rabbit / Influência do cozimento na composição de ácidos graxos fosfolipídos intramusculares do coelho inra

ABSTRACT: The effect of boiling, microwaving and aluminium (Al) foil-baking on composition of intramuscular phospholipid fatty acids of Inra rabbit was evaluated. Results showed that, the proportion of polyunsaturated fatty acids (PUFA)(e.g. C18:2n-6, C20:4n-6, C20:5n-3, C22:5n-3 and C22:6n-3) and monounsaturated fatty acids (MUFA)(e.g. C18:1n-7 and C18:1n-9) of treated longissimus dorsi muscle (LD) decreased, whilst the proportion of saturated (SFA)(e.g. C16:0 and C18:0) and n-6/n-3 value increased during cooking. Among the three treatments, microwaving can do better to stop the unsaturated fatty acids (UFA) being destroyed than boiling and Al foil-baking. However, boiling treatment did more serious damage to PUFA portion. Even so, the n-6/n-3 values of all of the cooked LD were within the recommended range. By analysis of partial least squares regression (PLSR), the microwaving treatment was more suitable in reserving UFA of intramuscular phospholipids from inra rabbit.

RESUMO: Avaliou-se o efeito do cozimento da fervura, emprego de microondas e de preparo da carne envolvida em alumínio (Al) de três formas de cocção na composição de ácidos graxos fosfolipídicos intramusculares de coelho Inra. Os resultados mostraram que, a proporção de ácidos graxos poliinsaturados (AGPI) (por exemplo, C18: 2n-6, C20: 4n-6, C20: 5n-3, C22: 5n-3 e C22: 6n-3) e ácidos graxos monoinsaturados (MUFA) (por exemplo, C18: 1n-7 e C18: 1n-9) de longissimus dorsimuscle (LD) tratado, diminuem, enquanto a proporção de saturado (SFA) (por exemplo, C16: 0 e C18: 0) e n-6 / n -3 valor aumentado durante o cozimento. Entre os três tratamentos, o micro-ondas parace ser o melhor por impedir a destruição dos ácidos graxos insaturados (UFA) do que a fervura e o cozimento em folha Al. No entanto, o tratamento de ebulição causou danos mais sérios à porção de PUFA. Mesmo assim, o valor n-6 / n-3 de todas as amostras de LD cozidas estava dentro da faixa recomendada. Por análise de regressão por mínimos quadrados parciais (PLSR), o tratamento com microondas foi mais adequado para preservar UFA de fosfolipídios intramusculares de Inra coelho.

Leporacarus gibbus (Acari: listrophoridae) in a naturally-infested domestic rabbit: first report of its occurrence in the state of Espírito Santo, Brazil / Leporacarus gibbus (Acari: listrophoridae) em um coelho doméstico naturalmente infestado: primeiro relato de sua ocorrência no estado do Espírito Santo, Brasil

This study aimed to report the first occurrence of Leporacarus gibbus in a domestic rabbit (Oryctolagus cuniculus) from the state of Espírito Santo, Brazil. The two-year-old male rabbit came from a rural area and was admitted to the Veterinary Hospital Professor Ricardo Alexandre Hippler with intense pruritus throughout the body, severe hair loss, crustal lesions on the outer surface of the ears, and desquamation mainly in the dorsal region. A skin scraping and trichogram were performed. In the microscopic evaluation of the hairs obtained from the dorsal region, mites with morphology compatible with L. gibbus were observed. Cheyletiella parasitovorax and Psoropotes cuniculi were also detected in the same region. Treatment with ivermectin (0.4 mg/kg) was prescribed with three applications every 14 days, over a period of six weeks. This report presents the first description of the occurrence of L. gibbus in the state of Espírito Santo concomitant with poly-infestation of C. parasitovorax and P. cuniculi, and it is hoped that this will provide a research tool for future work in the region.(AU)

Este trabalho teve como objetivo relatar a primeira ocorrência de Leporacarus gibbus em um coelho doméstico (Oryctolagus cuniculus) do estado do Espírito Santo, Brasil. O coelho macho de dois anos de idade veio de uma área rural e foi internado no Hospital Veterinário Professor Ricardo Alexandre Hippler com intenso prurido em todo o corpo, severa queda de cabelo, lesões crustais na superfície externa das orelhas e descamação principalmente na região dorsal. A raspagem da pele e o tricograma foram realizados. Na avaliação microscópica dos pêlos obtidos na região dorsal, observaram-se ácaros com morfologia compatível com L. gibbus. Cheyletiella parasitovorax e Psoropotes cuniculi também foram detectados na mesma região. O tratamento com ivermectina (0,4 mg / kg) foi prescrito com três aplicações a cada 14 dias, durante um período de seis semanas. Este relato apresenta a primeira descrição da ocorrência de L. gibbus no estado do Espírito Santo concomitante à poliinfestação de C. parasitovorax e P. cuniculi, e espera-se que esta seja uma ferramenta de pesquisa para futuros trabalhos na região.(AU)

Comparison of the effects of volemic reposition with 7. 5 % NaCl or blood in an experimental model of muscular compression and hemorrhagic shock / Comparação dos efeitos da reposição volêmica com NaCl 7, 5 % ou sangue em um modelo experimental de compressão muscular e choque hemorrágico

ABSTRACT Objective: Crush syndrome is characterized by traumatic muscular injuries with severe systemic clinical repercussions. The systemic inflammatory reaction characterized acutely by infiltration of neutrophils in the lungs has been studied as part of the spectrum of crush syndrome. Experimental research may demonstrate alternative treatments for crush syndrome. The authors studied the hypothesis that hypertonic saline solution (7.5% NaCl) could minimize the local and systemic effects in a model of muscular compression and hemorrhagic shock. Methods: Rabbits were submitted to a new model of muscle compression associated with hemorrhagic shock. Compression was applied through an Esmarch bandage, used for 1 h on the entire right lower limb. Hemorrhagic shock was induced for 1 h by dissection and catheterization of the carotid artery. Blood replacement or hypertonic saline solution was used to treat the shock. Biochemical analysis of plasma, quantification of muscular edema, and infiltration of inflammatory cells in the lungs were carried out. Results: Animals treated with hypertonic solution presented the same hemodynamic response as the blood treated patients, less water in the compressed muscles and less infiltration of inflammatory cells in the lungs. The blood group presented hypocalcemia, a facet of crush syndrome. Conclusions: The proposed model was effective for the study of crush syndrome associated with hemorrhagic shock. The treatment with hypertonic solution showed benefits when compared with blood volume replacement.

RESUMO Objetivo: A síndrome de esmagamento é caracterizada por lesões musculares traumáticas com graves repercussões clínicas sistêmicas. A reação inflamatória sistêmica, caracterizada agudamente por infiltração de neutrófilos nos pulmões, tem sido estudada como parte do espectro da síndrome de esmagamento. A pesquisa experimental pode demonstrar opções de tratamento para a síndrome de esmagamento. Os autores estudaram a hipótese de que solução salina hipertônica (NaCl 7,5%) pudesse minimizar os efeitos locais e sistêmicos da síndrome de esmagamento em um modelo de compressão muscular e choque hemorrágico. Métodos: Coelhos foram submetidos a um novo modelo de compressão muscular associado ao choque hemorrágico. A compressão foi feita por uma faixa de Esmarch aplicada por uma hora em todo membro inferior direito. O choque hemorrágico foi induzido durante uma hora por dissecção e cateterização da artéria carótida. O choque foi tratado com reposição de sangue ou solução salina hipertônica. Foram feitas análises bioquímicas do plasma, quantificação do edema muscular e infiltração de células inflamatórias nos pulmões. Resultados: Os animais tratados com solução hipertônica apresentaram a mesma resposta hemodinâmica observada naqueles tratados com sangue, menor quantidade de água nos músculos comprimidos e menor infiltração de células inflamatórias nos pulmões. O grupo tratado com sangue apresentou hipocalcemia, característica da síndrome de esmagamento. Conclusões: O modelo proposto mostrou-se efetivo para o estudo da síndrome de esmagamento associada ao choque hemorrágico. O tratamento com solução hipertônica apresentou benefícios quando comparado com a reposição volêmica com sangue.

Allogenic mesenchymal stem cell intravenous infusion in reparation of mild intestinal ischemia/reperfusion injury in New Zealand rabbits / Infusão intravenosa de células tronco mesenquimais alógenas na reparação da lesão branda de isquemia/reperfusão intestinal em coelhos Nova Zelândia

The present study aimed to evaluate the efficacy of mesenchymal stem cell (MSC) infusion, derived from adipose tissue, on reduction of local and remote tissue damage caused by the event of experimental intestinal I/R in New Zealand breed rabbits. For obtaining, characterization, and cultivation of MSC derived from adipose tissue (MSC-Adp), 3 juvenile animals (four months old) were used. The cells were considered to be viable for therapy after the fourth passage (in vitro phase). For the in vivo stage, 24 young adult animals (six months old) were used, weighing approximately 3.5 kg, in which were randomly divided into two groups, called: IR treated with MSC (I2H/R5H MSC 3D; I2H/R5H MSC 7D); IR treated with PBS (I2H/R5H PBS 3D; I2H/R5H PBS 7D). The animals were anesthetized and submitted to pre-retro-umbilical midline celiotomy. The extramural peri-intestinal marginal artery was located and clamped (predetermined and standardized region) with the aid of a vascular clip, promoting a 2 hour blood flow interruption. After this period, blood flow was reestablished, inhalatory anesthesia was suspended, and the animals awaken. After 5 hours of reperfusion, the treatments were performed by intravenous infusion according to the experimental groups. The animals were evaluated 72 hours and seven days after the treatment as for the macroscopic appearance (color and peristaltism) of the jejunal segment, and by histological evaluation of the ischemic segment for the presence or absence of destruction of the intestinal mucosa, edema, bleeding, dilation of lymph vessels, and presence of polymorphonuclear inflammatory cells, both in the mucosa and submucosa. The observed results revealed that the groups treated with MSC-Adp obtained smaller mucosal and submucosal lesions when compared to the groups treated with PBS. Also, MSC-Adp treated groups obtained controlled inflammatory response and higher mitotic rate, outcomes related to the therapeutic potential of MSC. Infusion of stem cells attenuated the lesions caused by intestinal I/R in both MSC groups when compared to the group treated with PBS.(AU)

O presente estudo teve como principal objetivo avaliar a eficácia da infusão células tronco mesenquimais (CTM) derivada de tecido adiposo sobre diminuição das lesões teciduais locais e remotas, causadas pelo evento de I/R intestinal experimental, em coelhos da raça Nova Zelândia. Para obtenção, cultivo e caracterização das CTM provenientes de tecido adiposo (ADCTM) foram utilizados 3 animais jovens. As células foram consideradas viáveis para terapia a partir da quarta passagem (fase in vitro). Para etapa in vivo foram utilizados 24 animais, adulto-jovens, pesando aproximadamente 3,5kg, divididos aleatoriamente em dois grupos experimentais, denominados IR Tratado com CTM (I2H/R5H CTM 3D; I2H/R5H CTM 7D); IR Tratado PBS (I2H/R5H PBS 3D; I2H/R5H PBS 7D). Os animais foram anestesiados e submetidos à celiotomia mediana pré-retroumbilical. A artéria marginal peri-intestinal extramural foi localizada e clampeada (região predeterminada e padronizada) com auxílio de um clipe vascular, promovendo uma interrupção do fluxo sanguíneo durante 2 horas. Após esse período, o fluxo sanguíneo foi restabelecido, a anestesia inalatória suspendida e os animais despertados. Após 5 horas de reperfusão realizou-se os tratamentos por infusão endovenosa, conforme grupos experimentais. Os animais foram avaliados 72 horas e sete dias após o tratamento quanto ao aspecto macroscópico (coloração e peristaltismo) do segmento jejunal e por meio de avaliação histológica do segmento isquemiado quanto à presença ou ausência de destruição de mucosa intestinal, edema, hemorragia, dilatação de vasos linfáticos e presença de células inflamatórias polimorfornucleares, tanto em mucosa quanto submucosa. Os resultados observados revelaram que os grupos tratados com ADCTM obtiveram menores lesões em mucosa e submucosa quando comprados aos grupos tratados com PBS. Ainda os grupos tratados com ADCTM obtiveram resposta inflamatória controlada e maior taxa mitótica, resultados relacionados ao potencial terapêutico das CTM.(AU)

Biocerâmica de fosfato de cálcio nanoestruturada micro-macroporosa em grânulos de absorção rápida no preenchimento de defeito crítico em rádio de coelhos (Oryctolagus cuniculus) / Bioceramics of calcium phosphate nano-structured micro-macro porous granules rapidly absorbed in filling critical radial defect in rabbits (Oryctolagus cuniculus)

O objetivo do presente trabalho foi avaliar, por radiografia, histologia e densitometria óssea, o efeito da HA/ßTCP em grânulos de absorção rápida em defeito ósseo crítico em rádio de coelhos. Foram utilizados 35 coelhos machos, da raça Nova Zelândia, e realizou-se um defeito crítico nos rádios direito e esquerdo. Os animais foram distribuídos em GI, enxerto autólogo e GII, HA/ßTCP em grânulos de absorção rápida. Avaliações radiográficas foram feitas antes da cirurgia, após, aos oito, 15, 30, 45 e 60 dias e avaliações histológicas e de densitometria. Verificou-se diferença significativa ao se comparar a densidade mineral óssea obtida ao longo do tempo de estudo. Observou-se formação de rede vascular entre os poros da biocerâmica desde o primeiro tempo de avaliação, (oito dias). Foram observados tecido ósseo primário e trabéculas em tecido ósseo preexistente a partir de 30 dias da implantação. Aos 60 dias, constatou-se presença de matriz óssea em segmentos ósseos preexistentes, caracterizando a formação óssea centrípeta. A biocerâmica HA/ßTCP nanoestruturada micro-macroporosa em grânulos de absorção rápida não causa alterações microscópicas indicativas de rejeição, permite a invasão e a multiplicação celular, bem como propicia a regeneração óssea, constituindo um implante apropriado para preenchimento de falhas ósseas críticas.(AU)

The objective of this study was to evaluate the effect of HA/ ßTCP on rapid absorption granules in rabbit radiography, histology, and bone densitometry. Thirty - five male rabbits of the New Zealand breed were used and a critical defect was performed on the right and left radios. The animals were distributed in GI, autologous graft and GII HA / ßTCP in rapidly absorbed granules. Radiographic, histological, and densitometry evaluations were performed before surgery, then after eight, 15, 30, 45 and 60 days. A significant difference was found when comparing the bone mineral density obtained over the study time. Formation of vascular network between the bioceramic pores was observed by the first evaluation time, (eight days). Primary bone tissue and trabeculae were observed from preexisting bone tissue after 30 days of implantation. At 60 days, the presence of bone matrix was observed from the preexisting bone segments, characterizing the centripetal bone formation. The micro-macroporous nanocomposite HA / ßTCP of rapidly absorbing granules do not cause microscopic changes indicative of rejection, allows invasion, cell multiplication, and promotes bone regeneration, constituting an appropriate implant for filling of critical bone failures.(AU)

Surgical sponge associated with platelets rich plasma in skin mesh grafts and layer in rabbits (Oryctolagus cuniculus) / Esponja cirúrgica associada com plasma rico em plaquetas em enxertos cutâneos em malha e camada em coelhos (Oryctolagus cuniculus)

The aim of this study was to evaluate of the efficacy of PRP employment associated with surgical sponges to improve the integration of the graft in the recipient bed. It was held at the Veterinary Hospital UNESP, Campus of Jaboticabal - SP, a study of 64 rabbits, divided into eight groups with eight animals. The groups were divided in control with saline solution 0,9%, control with PRP both without the sponge, surgical sponge with PRP, surgical sponge without PRP, and were used mesh and layer grafts in the respective groups. The data were submitted to statistical analysis (paired t-test, Kruskal-Wallis test, with subsequent use of the multiple comparison tests of Dunn, analysis of variance (F) test, Tukey test, P< 0.05). Edema and exudate with 3 and 3 and 7 days (P= 0,03 e P= 0,0049); coloring on the 14th day (P= 0,0001); cosmetic appearance on the 7th and 14th day (P= 0,0026 and P= 0,0001); mononuclear cells (P= 0,01) and polymorphonuclear (P= 0,01); fibroblast proliferation (P= 0,01); collagenous (P= 0,05); hemorrhage (P-007); necrosis and re-epithelialization (P= 0,2928 and P= 0,1). We concluded that the use of Platelet Rich Plasma Gel on skin grafts associated with a sponge as a compressive dressing promote the skin graft survival without a previous granulation tissue.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do PRP associado com esponjas cirúrgicas na integração do enxerto ao leito receptor. Realizou-se, no Hospital Veterinário da Unesp, Jaboticabal, SP, um estudo com 64 coelhos, separados em oito grupos, com oito animais. Os grupos foram: Gprpc (PRP, sem esponja cirúrgica, enxerto camada), Gprpce (PRP, esponja cirúrgica, enxerto camada), Gcc (solução fisiológica 0,9%, sem esponja cirúrgica, enxerto camada), Gcce (solução fisiológica 0,9%, esponjas cirúrgicas, enxerto camada), Gprpm (PRP, sem esponja cirúrgica, enxerto malha), Gprpme (PRP, esponja cirúrgica, enxerto malha), Gcm (solução fisiológica 0,9%, sem esponja cirúrgica, enxerto malha) e Gcce (solução fisiológica 0,9%, esponjas cirúrgicas, malha). Os dados foram analisados pelo teste t emparelhado, Kruskal-Wallis, análise de variância, e teste de Tukey (P<0,05). Edema e exsudato presente com três e sete dias (P=0,03 e P=0,0049); coloração cianótica no 14º dia (P=0,0001); aspecto cosmético bom no sétimo e no 14º dia (P=0,00026 e P=0,0001); presença de células mononucleares (P=0,01) e polimorfonucleares (P=0,01); proliferação de fibroblastos discreta (P=0,01); colagenização intensa (P=0,05); hemorragia discreta (P=0,007); ausência de diferença significativa em necrose e reepitelização (P=0,2928 e P=0,1). Conclui-se que o emprego do PRP gel em enxertos cutâneos associando esponjas cirúrgicas como curativo compressivo favorece sua integração ao leito receptor sem a presença prévia de tecido de granulação.(AU)

Hyaluronic acid and synovial fluid in preventing adhesion formation after tenorrhaphy: An in vivo study on rabbit Achilles tendon / Ácido hialurônico e líquido sinovial na prevenção da formação de aderências após tenorrafia: Um estudo in vivo sobre o tendão de Aquiles de coelho

ABSTRACT: Peritendinous adhesions are a significant problem in tendon surgery. One of the most preferred methods for preventing adhesion formation is anti-adhesive applications. This study aimed to investigate the efficacy of natural synovial fluid as an alternative viscoelastic agent for preventing adhesion in the healing period compared to hyaluronic acid. Thirty adult New Zealand rabbits were used in the study to form three experimental models. In all groups, a rupture was induced in the Achilles tendons. Following tenorrhaphy, hyaluronic acid was applied in one group and synovial fluid in the other group for anti-adhesive purposes. In the control group, no viscoelastic application was made. Bandage was applied to the operated extremities for three weeks post-operatively. At the end of five weeks, euthanasia was performed on the animals using pentobarbital sodium. Surgical sites in all groups were macroscopically examined for healing status as well as the presence and extent of adhesions. Biomechanical tests and histopathological examinations were then performed on the tendons in all groups. Findings established once again the positive contribution of hyaluronic acid to preventing adhesion formation as well as to healing and tensile strength in tendon surgery. Although, we found that it is possible to use synovial fluid, which is a natural source of hyaluronic acid, as a viscoelastic material, it is not superior to commercial hyaluronic acid preparation.

RESUMO: Asderências peritendinares são um problema significativo na cirurgia tendínea. Um dos métodos mais empregados para evitar a formação de adesão são as aplicações anti-adesivas. Este estudo tem como objetivo investigar a eficácia do líquido sinovial natural como um agente viscoelástico alternativo para prevenir a adesão no período de cicatrização comparado ao ácido hialurônico. Trinta coelhos adultos da Nova Zelândia foram utilizados no estudo para formar três modelos experimentais. Em todos os grupos, uma ruptura foi induzida nos tendões de Aquiles. Após tenorrafia, o ácido hialurônico foi aplicado em um grupo e o líquido sinovial no outro grupo para fins anti-adesivos. No grupo controle, não foi feita qualquer aplicação viscoelástica. A bandagem foi aplicada às extremidades operadas por três semanas pós-operatório. No final de cinco semanas, a eutanásia foi realizada nos animais utilizando pentobarbital sódico. Os locais cirúrgicos em todos os grupos foram examinados macroscopicamente quanto ao estado de cura, bem como a presença e extensão das aderências. Testes biomecânicos e exames histopatológicos foram realizados nos tendões em todos os grupos. Os achados estabeleceram mais uma vez a contribuição positiva do ácido hialurônico para prevenir a formação de aderências, bem como para a cicatrização e resistência à tração na cirurgia do tendão. Embora se tenha constatado que é possível utilizar fluido sinovial, que é uma fonte natural de ácido hialurónico, como material viscoelástico, não é superior à preparação de ácido hialurónico comercial.

Histochemical and immunohistochemical evaluation of angiogenesis in rabbits (Oryctolagus cuniculus) submitted to skin grafts associated with platelet-rich plasma / Histoquímica e imunohistoquíca na avaliação da angiogênese em coelhos submetidos ao emprego de enxertos cutâneos associado com plasma rico em plaquetas

Histochemical staining consists of a set of specific chemical reactions of structures or tissue-endogenous substances. Immunohistochemistry allows verification of proteins in tissues related to biological and pathological factors. The standardization of methods to assess angiogenesis resulting from formation of new blood vessels in procedures with stimulants is important to facilitate the implementation of research as well as to assist interpretation of data. In rabbits some markers of angiogenesis antibodies in the skin are not standardized because of cross-reactions that may occur because the antibodies are made from such animals.The aim of this study was to analyze the immunohistochemical methods through dyes and immunohistochemical markers angiogenesis in rabbits (Oryctolagus cuniculus) having undergone reconstructive surgery with skin grafts associated with plasma angiogenesis stimulator rich in platelets, in order to evaluate which method would be better to visualize the vessels, as well as to evaluate which antibody would promote better immunostaining, and find the differences between the methods and to standardize the methodology to be applied in experiments using rabbits. Sixteen rabbits were used, split into two groups of eight animals: Gprp (plasma rich in platelets) and Gc (control, saline solution, 9%). The same technique of reconstructive surgery using graft mesh was performed on each rabbit. The groups differed only in the application of platelet-rich plasma before the surgical wound synthesis. Samples for evaluation of angiogenesis were collected 15 days after the surgical procedure. The dyes Hematoxylin & Eosin and Masson's Trichrome were used in the histochemical study to evaluate vascular proliferation. Markers CD31, CD34 and Caveolin-1 was used for the immunohistochemical study. The evaluation between the groups (Gprp and Gc) in regard to the categorical variable (vascular proliferation intensity) used the Kruskal-Wallis test with p values equal to or less than 0.05 being considered significant. The immunohistochemistry was subjected to analysis of variance for a completely randomized design, with two groups and five repetitions (medium) and 5% significance level. Multiple comparison of groups resulted in the Tukey test (p=0.05) used. The amount of vascular proliferation assessed by histochemical method HE and Masson's Trichrome was found to be a significant variable in Gprp when compared with group Gc. When evaluating the methods used, there was no significant difference. There was no difference in the three markers which were used for correlating microvessels; however, there was more intense staining of vessels when Caveolin-1 Antibody was used. This caused intense marking of the capillaries and small vessels, as well as of larger vessels. When using CD31 and CD34, the same was observed, but it was not as intense as with Caveolin-1; though some cases showed sincere and discreet marking. The results of this study demonstrated that the histochemical methods performed are effective for semi-quantitative assessment of angiogenesis. The immunohistochemical comparison of Caveolin-1, CD31, and CD34 as markers of angiogenesis in rabbits showed that both antibodies could immunostain the newly formed vessels; but the Caveolin-1 showed better immunostaining in small and medium-sized vessels, as well as a minor presence in the background. Although not specific markers for angiogenesis, they can be used as immunohistochemical markers of vascular endothelium in rabbits.(AU)

Colorações histoquímicas consistem de um conjunto de reações químicas específicas das estruturas ou substâncias endógenas do tecido. Logo a Imunohistoquímica permite observar proteínas presentes nos tecidos relacionadas com fatores determinantes do comportamento biológico e patológico. A padronização dos métodos que avaliam a angiogênese decorrente de procedimentos que utilizam substâncias estimulantes à formação de novos vasos são importantes, a fim de facilitar a execução das pesquisas, bem como auxiliar na interpretação dos dados, visto que em coelhos alguns anticorpos marcadores de angiogênese na pele ainda não são padronizadas em virtude das reações cruzadas que podem ocorrer devido aos anticorpos serem confeccionados a partir de tais animais. Objetivou-se analisar os métodos histoquímicos por meio das colorações e imunohistoquímicas com marcadores de angiogênese em coelhos (Oryctolagus cuniculus) submetidos ao emprego de enxertos cutâneos associado com estimulador de angiogênese plasma rico em plaquetas, a fim de avaliar qual método seria melhor para visualização dos vasos, bem como avaliar qual anticorpo promoveria melhor imunomarcação, buscando-se assim encontrar a diferenças entre os métodos e padronizar a metodologia a ser aplicada em experimentos que utilizem coelhos. Utilizou-se 16 coelhos, separados em dois grupos com oito animais, compreendendo os grupos Gprp (plasma rico em plaquetas) e Gc (controle, solução fisiológica 0,9%). Em todos os animais foi realizada a mesma técnica de cirurgia reconstrutiva de enxertia do tipo malha, os grupos diferiram apenas a aplicação do plasma rico em plaquetas antes da síntese da ferida cirúrgica. As amostras para avaliação da angiogênese foram coletadas após 15 dias do procedimento cirúrgico. Utilizou-se no estudo histoquímico as colorações Hematoxilina & Eosina e Tricrômico de Masson para avaliação da proliferação vascular, e os anticorpos CD31 e CD34 e Caveolina - 1 para avaliação imunohistoquímica. A comparação entre os grupos (Gprp e Gc) em relação à variável categórica (intensidade de proliferação vascular) foi utilizado o teste de Kruskal-Wallis, com valores de p iguais ou inferiores a 0,05 foram considerados significativos. Os dados imuno-histoquímico foram submetidos à análise de variância para um delineamento inteiramente ao acaso, com 2 grupos e 5 repetições (médias) e nível de significância de 5%. Nas comparações múltiplas das médias dos grupos, utilizou-se o teste de Tukey (α = 0,05). A intensidade de proliferação vascular avaliada pelo método histoquímico HE e Tricômico de Masson encontrou-se que tal variável foi significativa no Gprp, quando comparado com o Gc. Avaliando os métodos utilizados não houve diferença significativa. A contagem microvascular (MVC) realizada com os diferentes marcadores (Caveolina-1, CD31 e CD34) foi significativa no Gprp. Correlacionando a contagem microvascular dos três marcadores utilizados não houve diferença significativa, no entanto observou-se marcação mais intensa dos vasos utilizando o anticorpo Caveolina-1, sendo intensa a marcação dos capilares, vasos de pequeno calibre, bem como em vasos maiores. Nas avaliações de CD31 e CD34 observou que houve imunomarcação dos vasos, porém não foi intensa como a Caveolina-1, alguns casos apresentaram fundo, bem como marcação discreta. Os resultados encontrados neste estudo evidenciaram os métodos histoquímicos são eficazes para avaliação semiquantitativa da angiogênese. A comparação imunohistoquímicas da Caveolina-1, CD31 e CD34 como marcadores de angiogênese em coelhos evidenciaram que ambos os anticorpos são capazes de imunomarcar os vasos neoformados, porém a Caveolina-1 apresentou melhor imunomarcação de vasos de pequeno e médio calibre, bem como menor presença de fundo, embora não seja um marcador específico para angiogênese pode ser utilizada como marcador imunohistoquímico de endotélio vascular em coelhos.(AU)

Características ultrassonográficas de fígado, vesícula biliar, rins, vesícula urinária e jejuno em coelhos jovens e adultos / Ultrasound features of liver, gallbladder kidneys, urinary bladder and jejunum in young and adult rabbits

O presente trabalho descreveu características e comparou mensurações do fígado, vesícula biliar, rins, vesícula urinária e jejuno de coelhos da raça Nova Zelândia Branco (NZB) jovens e adultos. O grupo dos jovens foi composto por 39 coelhos de ambos os sexos (20 machos e 19 fêmeas), desmamados aos 30-31 dias de idade, sendo as avaliações realizadas aos 35, 56 e 77 dias de idade. O grupo dos adultos foi composto por 23 fêmeas e 15 machos, com idade superior a 6 meses, sendo realizada uma avaliação ultrassonográfica por animal. O exame consistiu na avaliação do fígado, vesícula biliar, rins direito e esquerdo, jejuno e vesícula urinária. Todos os animais foram pesados antes dos exames. O peso médio dos animais aumentou (p<0,05) dos 35 dias até a idade adulta. Tanto nos adultos quanto nos jovens, o fígado apresentou-se predominantemente isoecogênico ao rim direito e com textura homogênea. A vesícula biliar apresentou-se em formato ovoide alongado, variando de piriforme à amendoado, com conteúdo anecogênico, não sendo visível em 2,6% dos coelhos jovens e em 26,3% dos adultos. O comprimento e a largura da vesícula biliar nas idades de 35, 56, 77 dias e adultos foram: 1,06 e 0,39; 1,44 e 0,53; 1,41 e 0,58; 1,57 e 0,67cm, respectivamente. Considerando jovens e adultos, as mensurações da vesícula biliar e dos rins esquerdo e direito apresentaram correlação positiva (p<0,05) com o peso. Os rins apresentaram-se no formato de elipse e com superfície regular, com aumento (p<0,05) dos 35 dias à idade adulta. Houve correlação positiva (p<0,05) entre os volumes renais direito e esquerdo. A descrição da vesícula urinária mais encontrada (86%) foi a com conteúdo anecogênico, com pequenas estruturas ecogênicas livres no lúmen, tanto em jovens quanto em adultos. Não houve diferença (p>0,05) da espessura das camadas do jejuno entre as idades, apresentando média de 0,23 cm para todos os animais. Estes são os primeiros dados brasileiros de características ultrassonográficas de fígado, vesícula biliar, rins, jejuno e vesícula urinária para coelhos NZB de 35, 56 e 77 dias de vida e adultos.(AU)

This study described characteristics and measurements of the liver, gallbladder, kidney, urinary bladder and jejunum of young and adults New Zealand White (NZW) rabbits. The young rabbits's group was composed of 39 rabbits of both sexes (20 males and 19 females), weaned at 30-31 days of age, and the evaluations carried out at 35, 56 and 77 days of age. The adults group was composed of 23 females and 15 males, with more than 6 months of age, and one ultrasonographic evaluation per animal. The exam consisted in the evaluation of liver, gallbladder, right and left kidneys, jejunum and urinary bladder. All the animals were weighed before the evaluations. The average weight increased (p<0.05) from 35 days to adults. Both in adult and in young rabbits, the liver presented predominantly isoechogenic in relation of right kidney and with homogeneous texture. The gallbladder had an elongated ovoid shape, ranging for pear-shaped to almond, with anechogenic content, not being visible in 2.6% of young rabbits and 26.3% of adults. The length and width were 1.06 and 0.39; 1.44 and 0.53; 1.41 and 0.58; 1.57 and 0.67cm, respectively at 35, 56, 77 days and adults. For young and adults rabbits, the gallbladder and the left and right kidneys were positively correlated (p<0.05) with weight. The kidneys had an ellipse shape with smooth surface, increasing (p>0.05) from 35 days to adulthood. There was a positive correlation (p<0.05) between the right and left kidney volumes. The description of urinary bladder more frequently (86%) observed was anechogenic content, with small free echogenic structure within the lumen, both in young and in adult rabbits. There was no difference (p>0.05) in the thickness of the layers of the jejunum among ages, with the mean of 0.23cm for all animals. With the results, the first Brazilian ultrasonographic data for liver, gallbladder, kidney, jejunum and urinary bladder were defined to NZW rabbits in 35, 56 and 77days of life, as well as adults.(AU)

Clinical assessment of acid-base balance in Netherland Dwarf rabbit

Abstract Pet rabbits have increased their popularity in a lot of countries. However, most of the laboratory profiles in rabbit medicine come from the observations made in rabbit as biomodels or meat production. So that further researches are necessary to obtain reference values for hematology and biochemical profiles in pet rabbits and the different breeds, especially, in relation to acid-base balance. The aim of this report was to offer the mean values of the main parameters connected with acid-base profile in Netherland Dwarf breed. Thirty-five healthy rabbits (15 males and 20 females) were studied. Venous blood sample from lateral saphenous vein was analyzed to measure: haematocrit, haemoglobin, blood urea nitrogen, glucose, blood pH, partial pressure of CO2 (pCO2), total CO2, ions bicarbonate, chloride, sodium, potassium, base excess and anion Gap. Results showed a shorter range that those reported by different researchers. Moreover, differences between genders were showed in pCO2, its values were higher in males. It may be associated with a greater cellular metabolism. Values obtained in this research should be taken into account by veterinary clinicians for this breed in their clinical assessments. Besides, these values provide new results in parameters with few reference values.

Resumo A popularidade de coelhos como animais de estimação aumentou em muitos países. No entanto, a maioria dos perfis de laboratório em medicina de coelhos advém das observações de biomodelos animais ou da produção de carne. Assim, são necessárias pesquisas adicionais para obter valores de referência para hematologia e perfis bioquímicos em coelhos de estimação, e das diferentes raças, especialmente, em relação ao equilíbrio ácido-base. O objetivo deste relatório foi oferecer os valores médios dos principais parâmetros ligados ao perfil ácido-base na raça Anã Holandês. Trinta e cinco coelhos saudáveis (15 machos e 20 fêmeas) foram estudados. A amostra de sangue venoso da veia safena lateral foi analisada para mensuração: hematócrito, hemoglobina, nitrogênio ureico sanguíneo, glicose, pH sanguíneo, pressão parcial de CO2 (pCO2), CO2 total, íons bicarbonato, cloreto, sódio, potássio, excesso de base e ânion Gap. Os resultados apresentaram um intervalo menor do que aqueles relatados por diferentes pesquisadores. Além disso, as diferenças entre os gêneros foram mostradas na pCO2, seus valores foram maiores no sexo masculino. Pode estar associado a um maior metabolismo celular. Os valores obtidos nesta pesquisa devem ser levados em consideração pelos clínicos veterinários para esta raça em suas avaliações clínicas. Além disso, esses valores fornecem novos resultados em parâmetros com poucos valores de referencia.

Influence of mononuclear cell therapy on disc degeneration in rabbits / Influência da terapia celular mononuclear sobre a degeneração discal em coelhos

ABSTRACT OBJECTIVE: The objective of this research was to evaluate the influence of autologous mononuclear stem cells injections on histological changes of collagen in the fibrous annulus of the intervertebral disk after experimental injury. METHODS: 32 New Zealand rabbits were submitted to intervertebral disk puncture, followed by intradiscal injection of mononuclear cells from the iliac crest versus saline injection in the following time periods: two months after the injury (SC2M and SS2M), two weeks (SC2W and SS2W) immediately after injury (SCCP and SSCP), and without inducing degeneration (SCSP and SSSP). Two months after cell therapy, the animals were euthanized and collagen changes in the intervertebral discs were histologically evaluated. RESULTS: There were significant differences in ELAF between SS2W and SS2S groups (p = 0.018). This difference was due to an increase in type I collagen in SS2W group (56.7%) compared to SC2S (13.28%). CONCLUSION: Treatment with mononuclear mesenchymal stem cells reduced changes in the type I and III collagen distribution in rabbits AF degenerated discs up to two weeks after the induction of degeneration.

RESUMO OBJETIVO: Avaliar a influência da injeção de células-tronco mononucleares autólogas sobre as alterações histológicas do colágeno no ânulo fibroso do disco intervertebral após lesão experimental. MÉTODOS: Foram submetidos 32 coelhos New Zealand a punção do discos intervertebrais lombares seguida de injeção intradiscal de células mononucleares provenientes da crista ilíaca versus injeção de solução salina nos seguintes períodos tempo: dois meses após a lesão (CT2M e SS2M), duas semanas (CT2S e SS2S), imediatamente após a lesão (CTCP e SSCP) e sem induzir a degeneração (CTSP e SSSP). Após dois meses da terapia celular, os animais foram submetidos a eutanásia e as alterações do colágeno nos discos intervertebrais foram avaliadas histologicamente. RESULTADOS: Houve diferença estatisticamente significativa na CEAF entre os grupos CT2S e SS2S (p = 0,018). Essa diferença decorreu de um aumento do colágeno do tipo I no grupo SS2S (56,7%) comparado com o CT2S (13,28%). CONCLUSÃO: O tratamento com células mononucleares precursoras mesenquimais é capaz de reduzir as alterações na distribuição do colágeno do tipo I e III no AF de discos degenerados de coelhos até duas semanas após a indução da degeneração.

Experimental acrylonitrile butadiene styrene and polyamide evisceration implant: a rabbit clinical and histopathology study / Estudo clínico e histopatológico em coelhos eviscerados com utilização de implantes de poliamida e acrilonitrila butadieno estireno

The purpose of this study was to evaluate acrylonitrile butadiene styrene (ABS) and polyamide implants in rabbits submitted to evisceration at the macroscopic and microstructure level and to assess clinical response and histopathological changes as well. For the experimental study implants of 12mm diameter were prepared by rapid prototyping, weighed and the outer and inner surfaces evaluated macroscopically and by electron microscopy. In addition, a compression test was performed and ultrastructural damage was then determined. After evisceration of the left eyeball, nine New Zealand rabbits received ABS implants and nine others received polyamide implants. The animals were assessed daily for 15 days after surgery and every seven days until the end of the study (90 days). Histopathological evaluation was performed at 15, 45 and 90 days after surgery. The ABS implants weighed approximately 0.44g, while the polyamide ones weighed 0.61g. Scanning electron microscopy demonstrated that the ABS implants had regular-sized, equidistant micropores, while the polyamide ones showed micropores of various sizes. The force required to fracture the ABS implant was 14.39 ±0.60 Mpa, while for the polyamide one, it was 16.80 ±1.05 Mpa. Fifteen days after surgery, we observed centripetal tissue infiltration and scarce inflammatory infiltrate. Implants may be used in the filling of anophthalmic cavities, because they are inert, biocompatible and allow tissue integration.(AU)

Avaliou-se a macroscopia, a microestrutura, a resposta clínica e histopatológica de implantes de acrilonitrila butadieno estireno (ABS) e poliamida em coelhos submetidos à evisceração. Para o estudo experimental, os implantes foram elaborados por meio de prototipagem rápida, com 12mm de diâmetro, pesados e tiveram suas superfícies avaliadas macroscopicamente e por microscopia eletrônica de varredura. Adicionalmente, foi realizado ensaio de compressão para determinar a força necessária para fraturar os implantes. Após a evisceração do olho esquerdo, nove coelhos da raça Nova Zelândia receberam implantes de poliamida e nove outros receberam implantes de ABS. Os animais foram avaliados diariamente nos primeiros 15 dias após a cirurgia e a cada sete dias até o fim do período experimental (90 dias). Avaliação histopatológica foi realizada aos 15, 45 e 90 dias após a cirurgia. Os implantes de ABS pesaram 0,44g, e os de poliamida 0,61g. A microscopia eletrônica de varredura demonstrou que os implantes de ABS eram formados por microporos equidistantes, enquanto os de poliamida apresentavam microporos de vários tamanhos. A força necessária para fraturar os implantes de ABS foi de 14.39±0.60 Mpa, enquanto para os de poliamida foi de 16.80±1.05Mpa. Quinze dias após a cirurgia, foi observada infiltração fibrovascular centrípeta. Os implantes podem ser utilizados para correção de cavidades anoftálmicas por se mostrarem inertes, biocompatíveis e permitirem a infiltração tecidual.(AU)

Evaluation of the effects of intra-arterial sugammadex and dexmedetomidine: an experimental study / Avaliação dos efeitos de sugamadex e dexmedetomidina intra-arterial: estudo experimental

Abstract Background: Intra-arterial injection of medications may cause acute and severe ischemia and result in morbidity and mortality. There is no information in the literature evaluating the arterial endothelial effects of sugammadex and dexmedetomidine. The hypothesis of our study is that sugammadex and dexmedetomidine will cause histological changes in arterial endothelial structure when administered intra-arterially. Methods: Rabbits were randomly divided into 4 groups. Group Control (n = 7); no intervention performed. Group Catheter (n = 7); a cannula inserted in the central artery of the ear, no medication was administered. Group Sugammadex (n = 7); rabbits were given 4 mg/kg sugammadex into the central artery of the ear, and Group Dexmedetomidine (n = 7); rabbits were given 1 µg/kg dexmedetomidine into the central artery of the ear. After 72 h, the ears were amputated and histologically investigated. Results: There was no significant difference found between the control and catheter groups in histological scores. The endothelial damage, elastic membrane and elastic fiber damage, smooth muscle hypertrophy and connective tissue increase scores in the dexmedetomidine and sugammadex groups were significantly higher than both the control and the catheter groups (p < 0.05). There was no significant difference found between the dexmedetomidine and sugammadex groups in histological scores. Conclusion: Administration of sugammadex and dexmedetomidine to rabbits by intra-arterial routes caused histological arterial damage. To understand the histological changes caused by sugammadex and dexmedetomidine more clearly, more experimental research is needed.

Resumo Justificativa: A injeção intra-arterial de medicamentos pode causar isquemia aguda e grave e resultar em morbidade e mortalidade. Não há informações na literatura que avaliem os efeitos endoteliais arteriais de sugamadex e dexmedetomidina. A hipótese de nosso estudo foi que dexmedetomidina e sugamadex causariam alterações histológicas na estrutura endotelial arterial quando administrados por via intra-arterial. Método: Os coelhos foram randomicamente divididos em quatro grupos: grupo controle (n = 7), sem intervenção; grupo cateter (n = 7), uma cânula foi inserida na artéria central da orelha e medicamentos não foram administrados; grupo sugamadex (n = 7), receberam 4 mg/kg de sugamadex na artéria central da orelha; grupo dexmedetomidina (n = 7), receberam 1 µg/kg de dexmedetomidina na artéria central da orelha. Após 72 horas, as orelhas foram amputadas e histologicamente examinadas. Resultados: Não houve diferença significativa entre os grupos controle e cateter referente aos escores histológicos. Os escores do dano causado ao endotélio e à membrana e fibra elásticas, da hipertrofia do músculo liso e do aumento do tecido conjuntivo foram significativamente maiores nos grupos dexmedetomidina e sugamadex do que nos grupos controle e cateter (p < 0,05). Não houve diferença significativa entre os grupos dexmedetomidina e sugamadex nos escores histológicos. Conclusão: A administração de sugamadex e dexmedetomidina a coelhos por via intra-arterial causou danos arteriais histológicos. Para entender as alterações histológicas causadas por sugamadex e dexmedetomidina com mais clareza, estudos experimentais adicionais são necessários.

Bacterial cellulose and bacterial cellulose/polycaprolactone composite as tissue substitutes in rabbits' cornea / Celulose bacteriana e composto de celulose bacteriana/policaprolactone para substituto tissular na córnea de coelho

In order to test the performance of bacterial cellulose/polycaprolactone composite (BC/PCL) and pure bacterial cellulose (BC) as tissue substitutes in rabbits' cornea, a superficial ulcer containing 5mm in diameter and 0.2mm deep was made in the right cornea of 36 rabbits, then a interlayer pocket was created from the basis of this ulcer. Twelve rabbits received BC/PCL membrane and 12 were treated with BC membranes, both membranes with 8mm in diameter. The remaining rabbits received no membrane constituting the control group. The animals were clinically followed up for 45 days. Three animals of each group were euthanized at three, seven, 21, and 45 days after implantation for histological examination of the cornea along with the implant. Clinical observation revealed signs of moderate inflammatory process, decreasing from day 20th in the implanted groups. Histology showed absence of epithelium on the membranes, fibroplasia close to the implants, lymph inflammatory infiltrate with giant cells, collagen disorganization, with a predominance of immature collagen fibers in both groups with implants. Although inflammatory response is acceptable, the membranes used does not satisfactorily played the role of tissue substitute for the cornea during the study period.(AU)

Com objetivo de testar o desempenho do compósito celulose bacteriana/policaprolactona (CB/PCL) e da celulose bacteriana pura (CB) como substitutos teciduais em córnea de coelhos, foi realizada uma úlcera superficial de 5 mm de diâmetro e 0,2 mm de profundidade na córnea direita de 36 coelhos, criando-se um bolso interlamelar a partir da base dessa úlcera. Doze animais receberam a membrana do compósito CB/PCL e 12 foram tratados com membranas de CB, ambas com 8 mm de diâmetro, os coelhos restantes não receberam nenhuma membrana, constituindo o grupo controle. Os animais foram acompanhados clinicamente até 45 dias. Três animais de cada grupo sofreram eutanásia aos três, sete, 21 e 45 dias após o implante das membranas para análise histológica da córnea juntamente com o implante. À observação clínica, houve sinais de processo inflamatório moderado, diminuindo a partir do 20º dia nos grupos implantados. A histologia demonstrou ausência de epitélio sobre as membranas, fibroplasia próxima aos implantes, infiltrado inflamatório linfo-histiocitário com células gigantes, desorganização do colágeno, com predominância de fibras imaturas de colágeno em ambos os grupos com implantes. Embora a resposta inflamatória seja aceitável, as membranas utilizadas não desempenharam satisfatoriamente o papel de substituto tecidual para a córnea, no período estudado.(AU)